寡腺苷酸合成酶ELISA試劑盒 間接法_夾心法_競爭法ELISA

ELISA方法可以分為兩類。**類：生物大分子的定量，**類：親和力測定評價或者篩選。抗體的穩(wěn)轉、瞬和發(fā)酵過程的表達量監(jiān)控，細胞因子的監(jiān)控，體內抗體藥物的藥代動力學，藥效生物標志物的含量檢測和免疫原性測定等可劃分為**類使用目的，雜交瘤的滴度測定，噬菌體展示的淘選篩選，體外抗體和對應靶點蛋白或細胞表面受體的親和力評價可劃分為**類使用目的。使用目的不一樣，即使使用同樣的試劑材料，也會有不同實驗模式和擬合曲線。下面小編將以某抗體的定量的方法開發(fā)（**類目的）和親和力檢測方法開發(fā)（**類目的）為例，對不同使用目的開發(fā)策略進行介紹。

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●穩(wěn)定轉染●：即進入細胞的質粒整合入細胞基因組中，并能隨細胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。這是相對瞬時轉染而言的。 瞬時轉染的表達時間短暫，外源基因導入整合基因組的幾率非常低，絕大部分以游離形式存在，不能隨細胞分裂而一同復制，導致后拷貝數被稀釋，無法達到持續(xù)表達外源基因的目的。一般用轉染試劑進行質粒轉染，多為瞬時轉染。 ●一般如下情況需要構建穩(wěn)定株●： 1. 長期在目的細胞中研究基因功能，通過構建穩(wěn)定株，可以大大降低頻繁轉染或者病毒包裝的成本，也極大方便實驗研究； 2. 部分蛋白半衰期極長，瞬時 RNA 只能干擾表達，無法去除已經表達的目的蛋白，通過構建穩(wěn)定株可以實現更好的基因干擾效果； 3. 瞬轉往往會引入極高拷貝數的表達，導致因為人為因素造成實驗結果的不**，構建穩(wěn)定株可以幫助篩選拷貝數適量的細胞進行實驗研究； 4. 需要用誘導表達系統的，主要是一些致死基因或者是需要時空表達的； 5. 需要用細胞做動物實驗的，比如裸鼠成瘤等，往往需要構建成穩(wěn)轉株。

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編輯：小檀20180925