白介素15ELISA試劑盒 (多種屬)實驗操作簡便
● 試劑盒操作步驟如下: ●
1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知,因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。
2.制備硝酸纖維素膜,用鉛筆標上每個待測一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說,一抗要檢測一到兩個稀釋度,而二抗要檢測兩到三個稀釋度。
3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點在膜上。每個點的體積越少越好(1-5μl),以保證點盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品,在點完一次后,干燥2-5分鐘,再點一次。讓膜干燥10-15分鐘,或直至無可見水分。
4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點,室溫震蕩孵育1h。
5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
6.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
8.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
9.準備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點完全濕潤,且印跡點在孵育過程中不會干。
10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。
11.將膜取出,放在塑料布或其它防護膜上。
12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。
13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號可能會持續(xù)6-24小時,這取決于具體的產(chǎn)品。
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●體外診斷試劑都是醫(yī)療器械嗎?●
答:在我國,大多數(shù)體外診斷試劑是按照醫(yī)療器械管理的,也有部分體外診斷試劑是按照藥品管理的。
按照藥品管理的主要是用于血源篩查的體外診斷試劑和采用放射性核素標記的體外診斷試劑,這些產(chǎn)品都不屬于醫(yī)療器械。
所有上市的體外診斷試劑均應經(jīng)過食品藥品監(jiān)督管理部門注冊或者備案,取得相關(guān)醫(yī)療器械注冊證或者備案憑證。
●主要有哪些單位在使用體外診斷試劑?●
答:體外診斷試劑屬于醫(yī)療器械管理范疇。我國醫(yī)療器械使用單位,是指使用醫(yī)療器械為他人提供醫(yī)療等技術(shù)服務的機構(gòu),包括取得醫(yī)療機構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證的醫(yī)療機構(gòu),取得計劃生育技術(shù)服務機構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證的計劃生育技術(shù)服務機構(gòu),以及依法不需要取得醫(yī)療機構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證的血站、單采血漿站、康復輔助器具適配機構(gòu)等。
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編輯:小檀20180925