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肌酸激酶MM型同工酶ELISA試劑盒ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法

肌酸激酶MM型同工酶ELISA試劑盒(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌

細(xì)胞凋亡發(fā)生時,內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶將分解核小體區(qū)間的雙鏈DNA,但核小體本身由于由組蛋白緊密結(jié)合而免受切割,單克隆抗體可以與核小體形成夾心結(jié)構(gòu),可通過檢測核小體判斷細(xì)胞是否經(jīng)歷凋亡事件。 原理:●細(xì)胞凋亡的發(fā)生,是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進(jìn)入核小體間切割DNA,產(chǎn)生180bp~200bp或其倍數(shù)的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復(fù)合物而不被核酸內(nèi)切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法,應(yīng)用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體,與核小體片段形成夾心結(jié)構(gòu),可特異性檢測細(xì)胞溶解物中的核小體片段。

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肌酸激酶MM型同工酶ELISA試劑盒,本應(yīng)用試劑盒已完成多中心臨床驗(yàn)證,并通過國家食藥監(jiān)總局的認(rèn)證。我司通過建立覆蓋歐美的全球采購中心,與歐美1000多個品牌建立了正式的代理與合作,涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,具有壓倒性地優(yōu)勢。產(chǎn)品領(lǐng)域:分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。主營產(chǎn)品:流式抗體、ELISA試劑盒、標(biāo)準(zhǔn)品和對照品、生化試劑、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。

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● 試劑盒操作步驟如下: ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知,因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜,用鉛筆標(biāo)上每個待測一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說,一抗要檢測一到兩個稀釋度,而二抗要檢測兩到三個稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl),以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品,在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘,或直至無可見水分。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn),室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。 9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤,且印跡點(diǎn)在孵育過程中不會干。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。 12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號可能會持續(xù)6-24小時,這取決于具體的產(chǎn)品。

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編輯:小檀20180914