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CHO/dhFr-倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷
貨號(hào)：BY-1298
品牌：乾思細(xì)胞
規(guī)格：T25瓶
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CHO/dhFr - 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞，二氫葉酸還原酶缺陷簡(jiǎn)介
CHO/dhFr - 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞是中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO）的特殊突變株，因其缺乏二氫葉酸還原酶（DHFR）活性而得名。DHFR 是葉酸代謝途徑中的關(guān)鍵酶，負(fù)責(zé)催化二氫葉酸還原為四氫葉酸，后者參與 DNA、RNA 和蛋白質(zhì)的合成。該細(xì)胞系由于 DHFR 基因缺陷，無(wú)法在不含次黃嘌呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基中存活，這一特性使其成為基因工程和生物制藥領(lǐng)域**價(jià)值的工具細(xì)胞。
從生物學(xué)特性來(lái)看，CHO/dhFr - 細(xì)胞保留了 CHO 細(xì)胞的基本形態(tài)與生長(zhǎng)特性，呈上皮樣貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞形態(tài)多為多邊形或不規(guī)則形，在適宜條件下增殖能力較強(qiáng)，倍增時(shí)間約為 18 - 24 小時(shí)，可穩(wěn)定傳代，適合大規(guī)模培養(yǎng)。但由于缺乏 DHFR，細(xì)胞生長(zhǎng)依賴外源提供的核苷酸前體（次黃嘌呤和胸腺嘧啶）。
在基因工程應(yīng)用中，CHO/dhFr - 細(xì)胞的 DHFR 缺陷特性成為篩選和擴(kuò)增外源基因的有效手段?？蒲腥藛T通常將編碼 DHFR 的基因與目的基因共同構(gòu)建到表達(dá)載體中，轉(zhuǎn)入 CHO/dhFr - 細(xì)胞后，將細(xì)胞置于不含次黃嘌呤和胸腺嘧啶且含有甲氨蝶呤（MTX）的培養(yǎng)基中篩選。MTX 是 DHFR 的強(qiáng)抑制劑，普通細(xì)胞會(huì)因 MTX 抑制 DHFR 活性導(dǎo)致核苷酸合成受阻而死亡，而成功轉(zhuǎn)入 DHFR 基因和目的基因的細(xì)胞則能夠利用 MTX 抗性存活并大量增殖，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目的基因陽(yáng)性克隆的高效篩選。同時(shí)，逐步提高 MTX 濃度，會(huì)促使細(xì)胞通過(guò)增加 DHFR 基因拷貝數(shù)來(lái)抵抗 MTX 抑制，由于目的基因與 DHFR 基因共表達(dá)，從而顯著提高目的蛋白的表達(dá)水平。
在生物制藥領(lǐng)域，CHO/dhFr - 細(xì)胞發(fā)揮著舉足輕重的作用。全球眾多上市的治療性單克隆抗體、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)激素等生物藥均采用該細(xì)胞系生產(chǎn)。其優(yōu)勢(shì)在于能夠?qū)Ρ磉_(dá)的蛋白進(jìn)行正確的折疊、糖基化等翻譯后修飾，生產(chǎn)出的重組蛋白藥物具有與天然蛋白相似的結(jié)構(gòu)和功能，且**性高、免疫原性低。此外，在基礎(chǔ)科研中，CHO/dhFr - 細(xì)胞也常用于研究基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制、蛋白質(zhì)功能及細(xì)胞信號(hào)通路等，為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供了重要的細(xì)胞模型。