MML 小鼠肺成纖維細(xì)胞
MML 小鼠肺成纖維細(xì)胞源自小鼠肺部組織，作為成纖維細(xì)胞家族的一員，在肺部疾病發(fā)**展機(jī)制研究、藥物篩選及組織修復(fù)探索等領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。該細(xì)胞系保留了肺成纖維細(xì)胞的典型生物學(xué)特性，為科研人員深入了解肺部生理病理過程提供了重要模型。
從細(xì)胞特性來看，MML 小鼠肺成纖維細(xì)胞呈貼壁生長，形態(tài)多為長梭形或不規(guī)則星形，細(xì)胞間常以放射狀或漩渦狀排列。在顯微鏡下，細(xì)胞輪廓清晰，細(xì)胞核大且居中，呈卵圓形，含有 1 - 2 個(gè)明顯核仁，細(xì)胞質(zhì)豐富且向外延伸出細(xì)長的突起，這些形態(tài)特征與其在肺組織中參與細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)建和組織支撐的功能相適應(yīng)。同時(shí)，該細(xì)胞表達(dá)成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物，如波形蛋白（Vimentin），而不表達(dá)上皮細(xì)胞標(biāo)志物，可通過免疫熒光等方法進(jìn)行鑒定。
培養(yǎng) MML 小鼠肺成纖維細(xì)胞時(shí)，常用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，添加 1% 的雙抗（青霉素和鏈霉素）以防止污染。細(xì)胞適宜生長在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中，當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí)，需使用胰酶 - EDTA 消化液進(jìn)行傳代，傳代比例通常為 1:3 - 1:5。凍存時(shí)，采用含 10% DMSO、90% 胎牛血清的凍存液，經(jīng)程序降溫后保存于液氮中。值得注意的是，為維持細(xì)胞正常的生物學(xué)功能，傳代次數(shù)一般不超過 20 代。
在科研應(yīng)用方面，MML 小鼠肺成纖維細(xì)胞用途廣泛。在肺部纖維化研究中，通過添加博來霉素、轉(zhuǎn)化生長因子 - β（TGF - β）等刺激劑，可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生纖維化表型改變，進(jìn)而研究肺纖維化的分子機(jī)制及探索潛在治療靶點(diǎn)；在藥物研發(fā)領(lǐng)域，可用于評估藥物對肺成纖維細(xì)胞增殖、遷移和細(xì)胞外基質(zhì)分泌的影響，篩選抗肺纖維化或促進(jìn)肺組織修復(fù)的藥物；此外，該細(xì)胞還可作為共培養(yǎng)體系的一部分，與肺泡上皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞等聯(lián)合，研究肺部細(xì)胞間的相互作用及其在疾病發(fā)生中的作用。
MML 小鼠肺成纖維細(xì)胞的優(yōu)勢在于其來源明確，能夠較好模擬體內(nèi)肺成纖維細(xì)胞的功能，且培養(yǎng)條件成熟，操作相對簡便。然而，它也存在一定局限性，作為小鼠來源細(xì)胞，與人肺成纖維細(xì)胞存在種屬差異，實(shí)驗(yàn)結(jié)果向臨床轉(zhuǎn)化時(shí)需謹(jǐn)慎驗(yàn)證；同時(shí)，細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中可能隨著傳代發(fā)生老化，導(dǎo)致細(xì)胞特性改變。
使用 MML 小鼠肺成纖維細(xì)胞時(shí)，需定期檢測細(xì)胞的標(biāo)志物表達(dá)和功能狀態(tài)，確保細(xì)胞質(zhì)量；嚴(yán)格遵循無菌操作，避免污染；在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中充分考慮種屬差異，結(jié)合其他模型綜合分析結(jié)果，從而推動肺部疾病相關(guān)研究的深入開展。