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Ehrlich艾氏腹水瘤瘤株
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Ehrlich 艾氏腹水瘤瘤株

Ehrlich 艾氏腹水瘤瘤株(Ehrlich Ascites Tumor, EAT)是一種經(jīng)典的小鼠腹水型癌細(xì)胞系,起源于小鼠乳腺腺癌,具有高度侵襲性和增殖能力。該瘤株自 1906 年由 Paul Ehrlich **建立以來(lái),已成為腫瘤生物學(xué)、藥理學(xué)和免疫學(xué)研究中常用的模型,尤其在腹水型腫瘤機(jī)制、**藥物篩選及免疫治療研究中具有重要價(jià)值。

一、生物學(xué)特性

  1. 細(xì)胞來(lái)源與形態(tài)
    • 源于小鼠乳腺腺癌,可通過(guò)腹腔接種在同源或免疫缺陷小鼠(如 BALB/c、ICR 小鼠)體內(nèi)快速形成腹水瘤。
    • 腹水瘤細(xì)胞呈圓形或卵圓形,懸浮生長(zhǎng),細(xì)胞核大且深染,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)空泡,分裂相常見(jiàn),具有典型的癌細(xì)胞特征。
  2. 生長(zhǎng)與擴(kuò)散特性
    • 高增殖率:接種后 1-2 天即可在腹腔內(nèi)快速增殖,7-10 天達(dá)到生長(zhǎng)高峰,腹水量顯著增加,癌細(xì)胞密度可達(dá) 。
    • 侵襲性:除腹腔擴(kuò)散外,晚期可轉(zhuǎn)移至肝臟、脾臟等器官,模擬臨床腫瘤的播散過(guò)程。
  3. 抗原特性
    • 表達(dá)腫瘤特異性抗原(如 Ehrlich 抗原),可誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生免疫應(yīng)答,但其免疫原性較弱,易逃避免疫監(jiān)視,適合研究腫瘤免疫逃逸機(jī)制。

二、培養(yǎng)與接種方法

  1. 體外培養(yǎng)
    • 可在含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 或 DMEM 培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng),但體外傳代后增殖能力和生物學(xué)特性可能逐漸改變,因此實(shí)驗(yàn)中更常用體內(nèi)傳代(腹腔接種)維持瘤株活性。
  2. 體內(nèi)接種
    • 腹水制備:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的腹水瘤細(xì)胞,經(jīng)離心洗滌后,用生理鹽水調(diào)整細(xì)胞濃度至 
    • 接種途徑:通過(guò)腹腔注射(ip)接種至小鼠體內(nèi),通常每只小鼠接種 0.1-0.2 mL 細(xì)胞懸液,7-10 天后可收集大量腹水用于實(shí)驗(yàn)。

三、應(yīng)用場(chǎng)景

  1. **藥物篩選與藥效評(píng)估
    • 腹腔接種 EAT 瘤株后,可通過(guò)觀察腹水量、癌細(xì)胞計(jì)數(shù)、小鼠存活時(shí)間等指標(biāo),快速評(píng)估化療藥物(如順鉑、5 - 氟尿嘧啶)或天然化合物的抗腫瘤活性。
    • 優(yōu)勢(shì):模型構(gòu)建簡(jiǎn)單、周期短(通常 2-3 周可完成藥效實(shí)驗(yàn)),適合高通量篩選。
  2. 腫瘤免疫機(jī)制研究
    • 用于研究宿主免疫細(xì)胞(如 T 細(xì)胞、NK 細(xì)胞)對(duì)腹水瘤的識(shí)別與清除機(jī)制,或評(píng)估免疫佐劑(如卡介苗、細(xì)胞因子)的抗腫瘤效果。
    • 例如,通過(guò)敲除免疫相關(guān)基因(如 IFN-γ、PD-1)的小鼠模型,分析 EAT 瘤株的生長(zhǎng)與免疫逃逸關(guān)聯(lián)。
  3. 腹水型腫瘤病理機(jī)制研究
    • 模擬臨床惡性腹水的形成過(guò)程,研究血管通透性增加、腹腔微環(huán)境(如細(xì)胞因子、基質(zhì)成分)對(duì)腫瘤擴(kuò)散的影響。
    • 可通過(guò)檢測(cè)腹水中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)等因子,探討腹水生成的分子機(jī)制。
  4. 新型治療技術(shù)驗(yàn)證
    • 如納米藥物遞送系統(tǒng)、光動(dòng)力療法、基因治療等在腹水瘤模型中的靶向性與療效評(píng)估。

四、優(yōu)勢(shì)與局限性

  • 優(yōu)勢(shì)
    1. 建模成功率高,小鼠存活率穩(wěn)定,適合重復(fù)性實(shí)驗(yàn);
    2. 腹水樣本易于獲取,可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)腫瘤負(fù)荷;
    3. 成本較低,無(wú)需特殊設(shè)備,適合基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室使用。
  • 局限性
    1. 為小鼠來(lái)源腫瘤,與人腫瘤的分子特征存在差異,臨床轉(zhuǎn)化需謹(jǐn)慎;
    2. 體外培養(yǎng)難度大,長(zhǎng)期傳代可能導(dǎo)致基因突變或表型改變;
    3. 免疫原性較弱,在免疫健全小鼠中可能無(wú)法完全模擬人類腫瘤的免疫微環(huán)境。

五、注意事項(xiàng)

  1. 瘤株保存:通過(guò)液氮凍存(含 10% DMSO 的胎牛血清)長(zhǎng)期保存,避免反復(fù)傳代導(dǎo)致細(xì)胞特性改變。
  2. 生物**:操作時(shí)需注意防護(hù),避免腹水泄漏污染,實(shí)驗(yàn)后廢棄物需按生物危害物處理。
  3. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):需設(shè)置嚴(yán)格對(duì)照(如生理鹽水對(duì)照組、陽(yáng)xing藥物對(duì)照組),并考慮小鼠品系、性別、年齡對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

總結(jié)

Ehrlich 艾氏腹水瘤瘤株以其易操作性和穩(wěn)定的生物學(xué)特性,成為腫瘤研究中經(jīng)典的動(dòng)物模型。盡管存在種屬差異等局限,但其在基礎(chǔ)機(jī)制研究和藥物初篩中仍具有不可替代的價(jià)值。隨著基因編輯技術(shù)和人源化模型的發(fā)展,結(jié)合 EAT 瘤株的改良模型(如表達(dá)人類腫瘤抗原的轉(zhuǎn)基因株)將進(jìn)一步拓展其應(yīng)用場(chǎng)景,為腫瘤治療提供更精準(zhǔn)的研究工具。