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4D3小鼠雜交瘤細(xì)胞
貨號(hào):BY-1146
品牌:其它品牌
規(guī)格:T25瓶
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4D3 小鼠雜交瘤細(xì)胞
4D3 小鼠雜交瘤細(xì)胞是通過(guò)將小鼠 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合獲得的特殊細(xì)胞系,憑借其穩(wěn)定分泌特異性抗體和無(wú)限增殖的能力,成為免疫學(xué)研究、單克隆抗體制備領(lǐng)域的重要模型。
從細(xì)胞特性來(lái)看,4D3 細(xì)胞呈懸浮生長(zhǎng)狀態(tài),在顯微鏡下,細(xì)胞多為圓形或橢圓形,直徑約 10 - 15μm,折光性良好。細(xì)胞核大而圓,核仁清晰可見,占據(jù)細(xì)胞約三分之二的空間,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)偶見與抗體合成相關(guān)的囊泡結(jié)構(gòu)。利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè),可發(fā)現(xiàn)其穩(wěn)定表達(dá) CD19、CD79a 等 B 淋巴細(xì)胞特異性標(biāo)志物,證實(shí)其 B 細(xì)胞來(lái)源屬性。此外,細(xì)胞染色體核型穩(wěn)定,確保了在體外長(zhǎng)期傳代過(guò)程中,仍能維持穩(wěn)定的增殖和抗體分泌能力。
培養(yǎng) 4D3 細(xì)胞時(shí),常用添加 10% - 15% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基,同時(shí)加入 1% 的雙抗(青霉素和鏈霉素)防止細(xì)菌污染。細(xì)胞適宜在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中生長(zhǎng),當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到
時(shí),需及時(shí)進(jìn)行傳代。傳代采用離心重懸法,按 1:3 - 1:5 的比例將細(xì)胞接種至新的培養(yǎng)瓶。凍存時(shí),使用含 10% DMSO、90% 胎牛血清的凍存液,經(jīng)程序降溫后保存于液氮,以維持細(xì)胞活性。
在科研應(yīng)用方面,4D3 小鼠雜交瘤細(xì)胞主要用于單克隆抗體制備??蒲腥藛T通過(guò)免疫小鼠,獲取能識(shí)別特定抗原的 B 淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞融合篩選出 4D3 細(xì)胞后,經(jīng)克隆化培養(yǎng),可產(chǎn)生針對(duì)單一抗原表位的高特異性單克隆抗體。這些抗體在疾病診斷領(lǐng)域,可用于開發(fā)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑、病原體快速診斷試劑盒;在基礎(chǔ)研究中,有助于探究抗原 - 抗體相互作用機(jī)制、解析細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路;在治療領(lǐng)域,可作為靶向藥物的基礎(chǔ),通過(guò)偶聯(lián)細(xì)胞毒素或放射性核素,實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的精準(zhǔn)治療。
4D3 細(xì)胞系的優(yōu)勢(shì)明顯,其抗體分泌穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性高,適合大規(guī)模生產(chǎn);體外培養(yǎng)技術(shù)成熟,操作相對(duì)簡(jiǎn)便,便于實(shí)驗(yàn)室開展研究。但也存在局限性,細(xì)胞融合后的篩選過(guò)程繁瑣且耗時(shí),部分 4D3 細(xì)胞在長(zhǎng)期傳代過(guò)程中可能出現(xiàn)抗體分泌能力下降或丟失的情況;此外,小鼠來(lái)源的單克隆抗體應(yīng)用于人體時(shí),存在免疫原性問(wèn)題,通常需要進(jìn)行人源化改造以降低免疫排斥反應(yīng)。
使用 4D3 小鼠雜交瘤細(xì)胞時(shí),需定期檢測(cè)細(xì)胞的抗體分泌活性,及時(shí)篩選出穩(wěn)定分泌的細(xì)胞株;嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,防止細(xì)胞污染;同時(shí)合理控制傳代次數(shù),避免因過(guò)度傳代導(dǎo)致細(xì)胞老化,從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。憑借其獨(dú)特的生物學(xué)特性,4D3 細(xì)胞將持續(xù)推動(dòng)生命科學(xué)研究與生物醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展。