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NIH/3T3小鼠胚胎細胞
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NIH/3T3 小鼠胚胎細胞
NIH/3T3 小鼠胚胎細胞作為生命科學領(lǐng)域的經(jīng)典細胞系,在細胞生物學、腫瘤學、分子生物學等研究中發(fā)揮著不可或缺的作用,為探索細胞生理病理機制提供了重要實驗基礎(chǔ)。
NIH/3T3 細胞源于美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)從 Swiss 小鼠胚胎中分離并連續(xù)傳代培養(yǎng)獲得的成纖維細胞系。該細胞呈貼壁生長,在顯微鏡下觀察,形態(tài)多為梭形或不規(guī)則多邊形,細胞間連接緊密,呈典型的成纖維細胞 “漩渦狀” 排列。NIH/3T3 細胞具有接觸抑制特性,當細胞生長至相互接觸形成致密單層時,會停止增殖,這種特性使其在培養(yǎng)過程中呈現(xiàn)均勻、有序的生長狀態(tài),與許多腫瘤細胞的無限制生長形成鮮明對比。此外,該細胞增殖能力穩(wěn)定,細胞周期相對規(guī)律,倍增時間約為 24 - 36 小時,便于科研人員進行標準化實驗操作和數(shù)據(jù)對比。
培養(yǎng) NIH/3T3 細胞需要嚴格把控條件。常用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,為細胞提供生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子和激素;添加 1% 的青霉素 - 鏈霉素混合液防止微生物污染。細胞需在 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中生長,二氧化碳可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基 pH 值,維持細胞適宜的生存環(huán)境。在培養(yǎng)過程中,當細胞融合度達到 80% - 90% 時,使用 0.25% 胰蛋白酶 - 0.53mM EDTA 消化液進行消化傳代。傳代時需注意控制消化時間,避免過度消化導致細胞損傷;同時,為維持細胞良好的生長狀態(tài)和生物學特性,需定期復蘇凍存的低代數(shù)細胞,防止細胞在長期傳代過程中出現(xiàn)老化或性狀改變。
在科研應用方面,NIH/3T3 細胞具有廣泛用途。在細胞轉(zhuǎn)化實驗中,它常作為指示細胞,用于檢測潛在致癌物質(zhì)或病毒對細胞的轉(zhuǎn)化能力,通過觀察細胞形態(tài)、生長特性及接觸抑制現(xiàn)象的改變,評估物質(zhì)的致癌風險。在基因功能研究中,科研人員可將外源基因?qū)?NIH/3T3 細胞,分析基因過表達或敲低對細胞增殖、遷移、凋亡等生物學行為的影響,探究基因的功能和調(diào)控機制。此外,該細胞還可用于藥物篩選和毒性測試,評估藥物對正常細胞的作用效果和潛在副作用,為新藥研發(fā)和**性評價提供重要參考。
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