ELISA是一個間接的檢測過程,這在很多文獻(xiàn)資料上都有這樣的記載。但是很少有研究資料詳細(xì)的描述間接測量的信號傳遞過程,以及傳遞過程中出現(xiàn)的偏差。這里小編從宏觀和微觀兩個角度對ELISA進(jìn)行系統(tǒng)分析,該分析有助于搭建穩(wěn)定的ELISA平臺,并正確地使用和評估不同性質(zhì)的酶聯(lián)抗體和顯色液等通用材料。
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●使用 RIPA 提取的總蛋白總結(jié)●: 1. 并非是真正意義上的總蛋白,相當(dāng)一部分蛋白丟失在棄去的不可溶組分中。 2. 很多常用的內(nèi)參,如 Actin,tubulin,LaminA,H3 等均在 RIPA 不可溶組分中被丟失。 3. 目標(biāo)蛋白可能會在 RIPA 不可溶組分中被丟失,也可能不被丟失,具有不可預(yù)見性,非選擇性。 4. 同種蛋白在不同樣品中丟失的情況并不相同,蛋白丟失并不成比例。 5. 利用目的蛋白和內(nèi)參比值做校正會出現(xiàn)偏差,不適合 WB 目的蛋白的半定量分析。
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編輯:小檀20181229
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