ELISA是一個(gè)間接的檢測(cè)過(guò)程,這在很多文獻(xiàn)資料上都有這樣的記載。但是很少有研究資料詳細(xì)的描述間接測(cè)量的信號(hào)傳遞過(guò)程,以及傳遞過(guò)程中出現(xiàn)的偏差。這里小編從宏觀和微觀兩個(gè)角度對(duì)ELISA進(jìn)行系統(tǒng)分析,該分析有助于搭建穩(wěn)定的ELISA平臺(tái),并正確地使用和評(píng)估不同性質(zhì)的酶聯(lián)抗體和顯色液等通用材料。
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人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)試劑盒,
檢測(cè)范圍:歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書. 產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。 主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等 經(jīng)營(yíng)種類:進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn) 性狀:盒裝液體 試劑盒保存:2-8℃低溫保存。 標(biāo)本:血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。 ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。 預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)試劑盒試劑盒(多種屬)行業(yè)操作流程如下: (1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl?!? (2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。 (3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。 (4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF工作液50μl?!? (5)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 (6)洗板,同(4)?!? (7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔工作液 100μl?!? (8)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!? (9)洗板,同(4)。 (10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min?!? (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?!? (12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以由容器上的劃痕或指印等造成的光。 (13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定。
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編輯:小檀20181226
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