酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)已經(jīng)成為實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)蛋白含量變化的實(shí)驗(yàn)技術(shù),常用的檢測(cè)方法是用抗原包被孔板,然后用一抗和二抗檢測(cè)抗原的變化。這里使用兩種抗體的原因一方面是信號(hào)放大的需要,另一方面是要減少成本。假如每種抗體都用酶或者熒光素標(biāo)記的話,那將會(huì)需要多少種標(biāo)記的抗體呢?而且可以肯定價(jià)格一定不菲。而用標(biāo)記二抗的方法就可以大大減少需要標(biāo)記抗體的數(shù)目,同時(shí)也能提高標(biāo)記抗體的效用,這樣就能用盡量少的標(biāo)記抗體滿足盡量多的實(shí)驗(yàn)要求。
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●檢測(cè)試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理●:樣品中未知量的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合包被在微孔中的抗體結(jié)合位點(diǎn)上。溫育后洗板以終止競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。
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編輯:小檀20181220
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