人蛋白聚糖(PG)試劑盒促銷

● 試劑盒操作步驟如下： ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知，因此有必要檢測(cè)寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜，用鉛筆標(biāo)上每個(gè)待測(cè)一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來(lái)說(shuō)，一抗要檢測(cè)一到兩個(gè)稀釋度，而二抗要檢測(cè)兩到三個(gè)稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個(gè)點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl)，以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品，在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘，或直至無(wú)可見(jiàn)水分。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn)，室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤(rùn),且印跡點(diǎn)在孵育過(guò)程中不會(huì)干。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。 12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時(shí)間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號(hào)可能會(huì)持續(xù)6-24小時(shí),這取決于具體的產(chǎn)品。

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時(shí)間：2018.12.20-2019.1.20

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人蛋白聚糖(PG)試劑盒，

● 試劑盒操作步驟如下： ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知，因此有必要檢測(cè)寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜，用鉛筆標(biāo)上每個(gè)待測(cè)一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來(lái)說(shuō)，一抗要檢測(cè)一到兩個(gè)稀釋度，而二抗要檢測(cè)兩到三個(gè)稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個(gè)點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl)，以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品，在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘，或直至無(wú)可見(jiàn)水分。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn)，室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤(rùn),且印跡點(diǎn)在孵育過(guò)程中不會(huì)干。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。 12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時(shí)間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號(hào)可能會(huì)持續(xù)6-24小時(shí),這取決于具體的產(chǎn)品。

檢測(cè)范圍：歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書(shū).
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T。
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類：進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn)
性狀：盒裝液體
試劑盒保存：2-8℃低溫保存。
標(biāo)本：血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

●分子實(shí)驗(yàn)中常用生化試劑原理匯總● 5．在用乙醇沉淀DNA時(shí)，為什么一定要加NaAc或NaCl至終濃度達(dá)0.1～0.25mol/L？在pH為8左右的溶液中，DNA分子是帶負(fù)電荷的，加一定濃度的NaAc或NaCl，使Na+中和DNA分子上的負(fù)電荷，減少DNA分子之間的同性電荷相斥力，易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀，當(dāng)加入的鹽溶液濃度太低時(shí)，只有部分DNA形成DNA鈉鹽而聚合，這樣就造成DNA沉淀不完全，當(dāng)加入的鹽溶液濃度太高時(shí)，其效果也不好。在沉淀的DNA中，由于過(guò)多的鹽雜質(zhì)存在，影響DNA的酶切等反應(yīng)，必須要進(jìn)行洗滌或重沉淀。 6．加核糖核酸酶降解核糖核酸后，為什么再要用SDS與KAc來(lái)處理？加進(jìn)去的RNase本身是一種蛋白質(zhì)，為了純化DNA，又必須去除之，加SDS可使它們成為SDS-蛋白復(fù)合物沉淀，再加KAc使這些復(fù)合物轉(zhuǎn)變?yōu)槿芙舛雀〉拟淃}形式的SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物，使沉淀更加完全。也可用飽和酚、氯仿抽提再沉淀，去除RNase。在溶液中，有人以KAc代替NaAc，也可以收到較好效果。 7．為什么在保存或抽提DNA過(guò)程中，一般采用TE緩沖液？在基因操作實(shí)驗(yàn)中，選擇緩沖液的主要原則是考慮DNA的穩(wěn)定性及緩沖液成分不產(chǎn)生干擾作用。磷酸鹽緩沖系統(tǒng)（pKa＝7.2）和硼酸系統(tǒng)（pKa=9.24）等雖然也都符合細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的生理范圍(pH)，可作DNA的保存液，但在轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)時(shí)，磷酸根離子的種類及數(shù)量將與Ca2＋產(chǎn)生Ca3(PO4)2沉淀；在DNA反應(yīng)時(shí)，不同的酶對(duì)輔助因子的種類及數(shù)量要求不同，有的要求高離子濃度，有的則要求低鹽濃度，采用Tris-HCl（pKa=8.0）的緩沖系統(tǒng)，由于緩沖液是TrisH+/Tris，不存在金屬離子的干擾作用，故在提取或保存DNA時(shí)，大都采用Tris-HCl系統(tǒng)，而TE緩沖液中的EDTA更能穩(wěn)定DNA的活性。 8．如何選擇聚乙二醇（6000）的濃度來(lái)沉淀DNA？采用PEG（6000）沉淀DNA，大小不同的DNA分子所用的PEG的濃度也不同，PEG的濃度低，選擇性沉淀DNA分子量大，大分子所需PEG的濃度只需1％左右，小分子所需PEG濃度高達(dá)20％。本實(shí)驗(yàn)選擇性沉淀4.3kb的pBR322質(zhì)粒DNA，每毫升加入0.4毫升的30％ PEG，其終PEG濃度為12％。PEG選擇性沉淀DNA的分辨率大約100bp。 9．抽提DNA去除蛋白質(zhì)時(shí)，怎樣使用酚與氯仿較好？酞與氯仿是非極性分子，水是極性分子，當(dāng)?shù)鞍姿芤号c酚或氯仿混合時(shí)，蛋白質(zhì)分子之間的水分子就被酚或氯仿擠去，使蛋白失去水合狀態(tài)而變性。經(jīng)過(guò)離心，變性蛋白質(zhì)的密度比水的密度為大，因而與水相分離，沉淀在水相下面，從而與溶解在水相中的DNA分開(kāi)。而酚與氯仿有機(jī)溶劑比重更大，保留在下層。作為表面變性的酚與氯仿，在去除蛋白質(zhì)的作用中，各有利弊，酚的變性作用大，但酚與水相有一定程度的互溶，大約10％～15％的水溶解在酚相中，因而損失了這部分水相中的DNA，而氯仿的變性作用不如酚效果好，但氯仿與水不相混溶，不會(huì)帶走DNA。所以在抽提過(guò)程中，混合使用酚與氯仿效果好。經(jīng)酚**次抽提后的水相中有殘留的酚，由于酚與氯仿是互溶的，可用氯仿**次變性蛋白質(zhì)，此時(shí)一起將酚帶走。也可以在**次抽提時(shí)，將酚與氯仿混合（1:1）使用。

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編輯：小檀20181220