引起 ELISA 測定結果與文獻報導不一致的原因主要有三點，試劑因素、標本因素和操作因素。 試劑因素：1. 試劑應選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用，包括底物和洗滌液。由于校準標準有差異，還有抗體、檢測方法、試劑、交叉反應等因素都會導致對樣本的檢測結果不一致。如：有的廠家酶標板孔間 CV 值大于 20%，標記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差，使用劣質的試劑必然導致結果的假陽性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號和出廠日期，雖然試劑的有效期多為 1 年，好選擇剛出廠的試劑盒。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標范圍，用一種指標來冒充其它指標，造成各種種屬、各種指標都可以做的假象。 標本因素和操作因素： 血清是常用的 ELISA 標本，血漿一般可視為與血清同等的標本，標本引起的假陽性和假陰性結果主要是干擾性物質所致，分為內(nèi)源性物質和外源性物質兩種。 內(nèi)源性物質:有人認為大約 40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質，可以不同程度影響檢測結果。常見的干擾物質有：類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應物質和其它物質等。 外源性物質:外源性物質常常是由于用于 ELISA 測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。
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大鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒，
檢測范圍：歡迎QQ或電話索取原版說明書. 產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T。 主要成分：酶標板,試劑,標準品等 經(jīng)營種類：進口分裝和原裝、國產(chǎn) 性狀：盒裝液體 試劑盒保存：2-8℃低溫保存。 標本：血清、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。 ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。 預期應用：ELISA法定量測定血清、、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量。
大鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒試劑盒（多種屬）行業(yè)操作流程如下： （1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl?！? （2）酶標板置4℃，包被過夜。 （3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。 （4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF工作液50μl。 （5）酶標板置37℃箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！? （6）洗板，同（4）?！? （7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔工作液 100μl。 （8）酶標板置37℃箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 （9）洗板，同（4）?！? （10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min?！? （11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 （12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以由容器上的劃痕或指印等造成的光。 （13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定。
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編輯：小檀20181212
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