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檢測(cè)范圍:歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書(shū).
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類(lèi):進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標(biāo)本:血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
● 試劑盒操作步驟如下: ●
1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知,因此有必要檢測(cè)寬范圍的稀釋度。
2.制備硝酸纖維素膜,用鉛筆標(biāo)上每個(gè)待測(cè)一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來(lái)說(shuō),一抗要檢測(cè)一到兩個(gè)稀釋度,而二抗要檢測(cè)兩到三個(gè)稀釋度。
3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個(gè)點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl),以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品,在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘,或直至無(wú)可見(jiàn)水分。
4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn),室溫震蕩孵育1h。
5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
6.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
8.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤(rùn),且印跡點(diǎn)在孵育過(guò)程中不會(huì)干。
10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。
11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。
12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時(shí)間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。
13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號(hào)可能會(huì)持續(xù)6-24小時(shí),這取決于具體的產(chǎn)品。
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編輯:小檀20181210