●分析數(shù)據(jù)的處理:● 通常,測定工作獲得一系列有關(guān)數(shù)據(jù)以后,需按以下原則記錄、運算和處理。 1、記錄與運算規(guī)則 主要說明食品分析中數(shù)據(jù)記錄與計算,其均按有效數(shù)字計算法則進行,即: ① 除特殊規(guī)定外,一般可疑數(shù)為后一位,有±1個單位的誤差; ② 復(fù)雜運算時,其中間過程可多保留一位,后結(jié)果需取應(yīng)有的位數(shù); ③ 加減法計算的結(jié)果,其小數(shù)點以后保留的位數(shù),應(yīng)與參加運算各數(shù)中小數(shù)點后位數(shù)小的相同; ④ 乘除法計算的結(jié)果,其有效數(shù)字保留的位數(shù)應(yīng)與參加運算各數(shù)中有效數(shù)字位數(shù)少者相同; 2、可疑值的取舍 同一樣品進行多次測定,常發(fā)現(xiàn)個別數(shù)據(jù)與其他數(shù)據(jù)相差較大,對這些不如意的數(shù)據(jù)不能任意棄去。除非分析者有足夠的理由確證這些數(shù)值是由于某種偶然過失或外來干擾而剔除外,否則都應(yīng)當依據(jù)誤差理論來確定這些數(shù)據(jù)的取舍。 3、標準曲線繪制 用吸光光度法、熒光光度法、原子吸收光度法、色譜分析法對某些成分進行測定時,常常需要制備一套具有一定梯度的系列標準溶液,測定其系數(shù)(吸光度、熒光強度、峰高),繪制標準曲線。在正常情況下,此標準曲線應(yīng)該是一條通過原點的直線,但在實際測定時,常出現(xiàn)某一、二點偏離直線的情況,這時,用小二乘方回歸法繪制標準曲線,就能得到合理的圖形。小二乘法計算,然后按回歸方程式計算結(jié)果,繪制標準曲線。 4、測定結(jié)果的校正 在食品分析中,常常因為系統(tǒng)誤差,使測定結(jié)果高于或低于檢測對象的實際含量,即回收率不是100%,所以需要在樣品測定的同時用加入回收法測定回收率,再利用回收率按下式對樣品的測定結(jié)果加以校正。
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●使用 RIPA 提取的總蛋白總結(jié)●: 1. 并非是真正意義上的總蛋白,相當一部分蛋白丟失在棄去的不可溶組分中。 2. 很多常用的內(nèi)參,如 Actin,tubulin,LaminA,H3 等均在 RIPA 不可溶組分中被丟失。 3. 目標蛋白可能會在 RIPA 不可溶組分中被丟失,也可能不被丟失,具有不可預(yù)見性,非選擇性。 4. 同種蛋白在不同樣品中丟失的情況并不相同,蛋白丟失并不成比例。 5. 利用目的蛋白和內(nèi)參比值做校正會出現(xiàn)偏差,不適合 WB 目的蛋白的半定量分析。
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編輯:小檀20181206
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