小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit九月開學(xué)季
簡述利用試劑盒法測定毒鼠強的原理并簡述此方法檢測固體樣品的過程?
● 試劑盒法檢測原理:毒鼠強可與二羥基萘二磺酸發(fā)生反應(yīng)變?yōu)榈仙?,本方法檢出限為1ug,低檢出濃度為2ug/ml,濃度高時可變?yōu)樯罴t色。
● 檢測固體樣品過程:取2mL或2g樣品放入比色管中,加入5mL乙酸乙酯,充分振搖,靜置,取上清液2mL于試管中或表面皿上,在 85℃左右水浴中加熱,待乙酸乙酯剩余1mL以下時,提高水浴溫度揮干余液,放至室溫后,加入1mL的純凈水充分溶解殘渣,加入3滴毒鼠強顯色劑,輕輕搖勻,加入 5mL毒鼠強試液,輕輕搖動后,將試管放入90℃以上水浴中,加熱5min后取出,觀察顏色變化。溶液顏色變?yōu)榈霞t色為毒鼠強陽性反應(yīng),隨著毒鼠強濃度增加,紫色加深。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。標(biāo)本:血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
(多種種屬)實驗科研認(rèn)可品牌
小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit,
簡述利用試劑盒法測定毒鼠強的原理并簡述此方法檢測固體樣品的過程?
● 試劑盒法檢測原理:毒鼠強可與二羥基萘二磺酸發(fā)生反應(yīng)變?yōu)榈仙?,本方法檢出限為1ug,低檢出濃度為2ug/ml,濃度高時可變?yōu)樯罴t色。
● 檢測固體樣品過程:取2mL或2g樣品放入比色管中,加入5mL乙酸乙酯,充分振搖,靜置,取上清液2mL于試管中或表面皿上,在 85℃左右水浴中加熱,待乙酸乙酯剩余1mL以下時,提高水浴溫度揮干余液,放至室溫后,加入1mL的純凈水充分溶解殘渣,加入3滴毒鼠強顯色劑,輕輕搖勻,加入 5mL毒鼠強試液,輕輕搖動后,將試管放入90℃以上水浴中,加熱5min后取出,觀察顏色變化。溶液顏色變?yōu)榈霞t色為毒鼠強陽性反應(yīng),隨著毒鼠強濃度增加,紫色加深。
檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營種類:進(jìn)口分裝和原裝、國產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標(biāo)本:血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
● 試劑盒操作步驟如下: ●
1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知,因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。
2.制備硝酸纖維素膜,用鉛筆標(biāo)上每個待測一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說,一抗要檢測一到兩個稀釋度,而二抗要檢測兩到三個稀釋度。
3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點在膜上。每個點的體積越少越好(1-5μl),以保證點盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品,在點完一次后,干燥2-5分鐘,再點一次。讓膜干燥10-15分鐘,或直至無可見水分。
4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點,室溫震蕩孵育1h。
5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
6.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
8.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點完全濕潤,且印跡點在孵育過程中不會干。
10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。
11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。
12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。
13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號可能會持續(xù)6-24小時,這取決于具體的產(chǎn)品。
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編輯:小檀20181112