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● 試劑盒操作步驟如下： ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知，因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜，用鉛筆標上每個待測一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說，一抗要檢測一到兩個稀釋度，而二抗要檢測兩到三個稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點在膜上。每個點的體積越少越好(1-5μl)，以保證點盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品，在點完一次后,干燥2-5分鐘,再點一次。讓膜干燥10-15分鐘，或直至無可見水分。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點，室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 9.準備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點完全濕潤,且印跡點在孵育過程中不會干。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護膜上。 12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號可能會持續(xù)6-24小時,這取決于具體的產(chǎn)品。

血管內(nèi)皮生長因子ELISA試劑盒(多種種屬)實驗科研認可品牌

人血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA Kit，

檢測范圍：歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T。
主要成分：酶標板,試劑,標準品等
經(jīng)營種類：進口分裝和原裝、國產(chǎn)
性狀：盒裝液體
試劑盒保存：2-8℃低溫保存。
標本：血清、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測定血清、、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

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●利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原，方法如下：● (1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液 (2) 37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體 (3) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物 (4)實驗完畢后，檢測其標準曲線，如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原，該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。 (5) 如果標準曲線無線性，則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用，則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

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編輯：小檀20181031