ELISA方法可以分為兩類。**類:生物大分子的定量,**類:親和力測定評價或者篩選??贵w的穩(wěn)轉(zhuǎn)、瞬和發(fā)酵過程的表達(dá)量監(jiān)控,細(xì)胞因子的監(jiān)控,體內(nèi)抗體藥物的藥代動力學(xué),藥效生物標(biāo)志物的含量檢測和免疫原性測定等可劃分為**類使用目的,雜交瘤的滴度測定,噬菌體展示的淘選篩選,體外抗體和對應(yīng)靶點(diǎn)蛋白或細(xì)胞表面受體的親和力評價可劃分為**類使用目的。使用目的不一樣,即使使用同樣的試劑材料,也會有不同實(shí)驗(yàn)?zāi)J胶蛿M合曲線。下面小編將以某抗體的定量的方法開發(fā)(**類目的)和親和力檢測方法開發(fā)(**類目的)為例,對不同使用目的開發(fā)策略進(jìn)行介紹。
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檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書. 產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。 主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等 經(jīng)營種類:進(jìn)口分裝和原裝、國產(chǎn) 性狀:盒裝液體 試劑盒保存:2-8℃低溫保存。 標(biāo)本:血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。 ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。 預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
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人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA Kit試劑盒(多種屬)行業(yè)操作流程如下: (1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl?!? (2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。 (3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。 (4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF工作液50μl?!? (5)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!? (6)洗板,同(4)?!? (7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔工作液 100μl。 (8)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 (9)洗板,同(4)?!? (10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?!? (12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以由容器上的劃痕或指印等造成的光。 (13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定。
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編輯:小檀20181017
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