人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA Kit高靈敏度的檢測
● 試劑盒操作步驟如下: ●
1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知,因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。
2.制備硝酸纖維素膜,用鉛筆標(biāo)上每個(gè)待測一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說,一抗要檢測一到兩個(gè)稀釋度,而二抗要檢測兩到三個(gè)稀釋度。
3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個(gè)點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl),以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品,在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘,或直至無可見水分。
4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn),室溫震蕩孵育1h。
5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
6.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
8.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤,且印跡點(diǎn)在孵育過程中不會(huì)干。
10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。
11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。
12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時(shí)間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。
13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號(hào)可能會(huì)持續(xù)6-24小時(shí),這取決于具體的產(chǎn)品。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。標(biāo)本:血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
骨成型蛋白2ELISA試劑盒(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌
人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA Kit,
檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營種類:進(jìn)口分裝和原裝、國產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標(biāo)本:血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
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●控制和消除誤差的方法:●
誤差的大小,直接關(guān)系到分析結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度。減少誤差的措施有如下幾種:
1、正確選取樣品量
樣品量的多少與分析結(jié)果的準(zhǔn)確度關(guān)系很大。在常量分析中,滴定量或重量過多或過少都直接影響準(zhǔn)確度。在比色分析中,含量與吸光度之間往往只在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。這就要求測定時(shí)讀數(shù)在此范圍內(nèi),以提高準(zhǔn)確度。通過增減取樣量或改變稀釋倍數(shù)可以達(dá)到此目的。
2、增加平行測定次數(shù)
減少偶然誤差測定次數(shù)越多,則平均值就越接近真實(shí)值,偶然誤差亦可抵消,所以分析結(jié)果就越可靠。一般要求每個(gè)樣品的測定次數(shù)不應(yīng)少于兩次,如要更**的測定,分析次數(shù)應(yīng)更多些。
3、對照試驗(yàn)
對照試驗(yàn)是檢查系統(tǒng)誤差的有效方法。在進(jìn)行對照試驗(yàn)時(shí),常常用已知結(jié)果的試樣與被測試樣一起按完全相同的步驟操作,或由不同單位、不同人員進(jìn)行測定,后將結(jié)果進(jìn)行比較。這樣可以抵消許多不明了因素引起的誤差。
4、空白試驗(yàn)
在進(jìn)行樣品測定過程的同時(shí),采用完全相同的操作方法和試劑,惟獨(dú)不加被測定的物質(zhì),進(jìn)行空白試驗(yàn)。在測定值中扣除空白值,就可以抵消由于試劑中的雜質(zhì)干擾等因素造成的系統(tǒng)誤差。
5、校正儀器和標(biāo)定溶液
各種計(jì)量測試儀器,如實(shí)驗(yàn)室電子天平、旋光儀、分光光度計(jì),以及移液管、滴定管、容量瓶等,在**的分析中必須進(jìn)行校準(zhǔn),并在計(jì)算時(shí)采用較正值。各種標(biāo)準(zhǔn)溶液(尤其是容易變化的試劑)應(yīng)按規(guī)定定期標(biāo)定,以保證標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度和質(zhì)量。
6、嚴(yán)格遵守操作規(guī)程
分析方法所規(guī)定的技術(shù)條件要嚴(yán)格遵守。經(jīng)國家或主管部門規(guī)定的分析方法,在未經(jīng)有關(guān)部門同意下,不應(yīng)隨意改動(dòng)。
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編輯:小檀20181017