多種屬一步法檢測 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3ELISA試劑盒
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3ELISA試劑盒 多種屬一步法檢測
●(多種屬)操作流程●:
1. 檢測試劑盒(多種屬)從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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●控制和消除誤差的方法:●
誤差的大小,直接關系到分析結果的精密度和準確度。減少誤差的措施有如下幾種:
1、正確選取樣品量
樣品量的多少與分析結果的準確度關系很大。在常量分析中,滴定量或重量過多或過少都直接影響準確度。在比色分析中,含量與吸光度之間往往只在一定范圍內(nèi)呈線性關系。這就要求測定時讀數(shù)在此范圍內(nèi),以提高準確度。通過增減取樣量或改變稀釋倍數(shù)可以達到此目的。
2、增加平行測定次數(shù)
減少偶然誤差測定次數(shù)越多,則平均值就越接近真實值,偶然誤差亦可抵消,所以分析結果就越可靠。一般要求每個樣品的測定次數(shù)不應少于兩次,如要更**的測定,分析次數(shù)應更多些。
3、對照試驗
對照試驗是檢查系統(tǒng)誤差的有效方法。在進行對照試驗時,常常用已知結果的試樣與被測試樣一起按完全相同的步驟操作,或由不同單位、不同人員進行測定,后將結果進行比較。這樣可以抵消許多不明了因素引起的誤差。
4、空白試驗
在進行樣品測定過程的同時,采用完全相同的操作方法和試劑,惟獨不加被測定的物質(zhì),進行空白試驗。在測定值中扣除空白值,就可以抵消由于試劑中的雜質(zhì)干擾等因素造成的系統(tǒng)誤差。
5、校正儀器和標定溶液
各種計量測試儀器,如實驗室電子天平、旋光儀、分光光度計,以及移液管、滴定管、容量瓶等,在**的分析中必須進行校準,并在計算時采用較正值。各種標準溶液(尤其是容易變化的試劑)應按規(guī)定定期標定,以保證標準溶液的濃度和質(zhì)量。
6、嚴格遵守操作規(guī)程
分析方法所規(guī)定的技術條件要嚴格遵守。經(jīng)國家或主管部門規(guī)定的分析方法,在未經(jīng)有關部門同意下,不應隨意改動。
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編輯:小檀20180925