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(循環(huán)酶法) 血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1ELISA試劑盒

血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1ELISA試劑盒 (循環(huán)酶法)

ELISA應用:ELISA檢測技術(shù)早在19世紀70,80年代就開發(fā)出來用于替代放射性同位素標記技術(shù)用于研究蛋白質(zhì)間的相互作用(配體-受體,抗原-抗體),到如今已經(jīng)接近50年的歷史了。這個技術(shù)從科研的角度來說已經(jīng)不具備**性,沒有太多的價值,不值得專門進行研究,更多的是一個使用的工具。工業(yè)應用落后于基礎(chǔ)研究,ELISA技術(shù)在制藥領(lǐng)域的應用隨著近20年生物制藥領(lǐng)域的迅猛發(fā)展展現(xiàn)著越來越多的使用價值,當然ELISA的應用情況也越來越復雜,這樣的復雜性也使得早期的基礎(chǔ)研究并不再具有很好的指導意義,ELISA方法濫用錯用往往導致實驗結(jié)果出現(xiàn)系統(tǒng)性偏差,影響實驗結(jié)果的真實性,做出錯誤的選擇。本文的寫作目的旨在作為文獻之外關(guān)于ELISA實際應用的一個總結(jié),反補基礎(chǔ)研究的不足,使得該技術(shù)更具使用價值。

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●穩(wěn)定轉(zhuǎn)染●:即進入細胞的質(zhì)粒整合入細胞基因組中,并能隨細胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。這是相對瞬時轉(zhuǎn)染而言的。 瞬時轉(zhuǎn)染的表達時間短暫,外源基因?qū)胝匣蚪M的幾率非常低,絕大部分以游離形式存在,不能隨細胞分裂而一同復制,導致后拷貝數(shù)被稀釋,無法達到持續(xù)表達外源基因的目的。一般用轉(zhuǎn)染試劑進行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,多為瞬時轉(zhuǎn)染。 ●一般如下情況需要構(gòu)建穩(wěn)定株●: 1. 長期在目的細胞中研究基因功能,通過構(gòu)建穩(wěn)定株,可以大大降低頻繁轉(zhuǎn)染或者病毒包裝的成本,也極大方便實驗研究; 2. 部分蛋白半衰期極長,瞬時 RNA 只能干擾表達,無法去除已經(jīng)表達的目的蛋白,通過構(gòu)建穩(wěn)定株可以實現(xiàn)更好的基因干擾效果; 3. 瞬轉(zhuǎn)往往會引入極高拷貝數(shù)的表達,導致因為人為因素造成實驗結(jié)果的不**,構(gòu)建穩(wěn)定株可以幫助篩選拷貝數(shù)適量的細胞進行實驗研究; 4. 需要用誘導表達系統(tǒng)的,主要是一些致死基因或者是需要時空表達的; 5. 需要用細胞做動物實驗的,比如裸鼠成瘤等,往往需要構(gòu)建成穩(wěn)轉(zhuǎn)株。

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編輯:小檀20180921