間接法_夾心法_競(jìng)爭(zhēng)法ELISA 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-β1ELISA試劑盒
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-β1ELISA試劑盒 間接法_夾心法_競(jìng)爭(zhēng)法ELISA
簡(jiǎn)述利用試劑盒法測(cè)定毒鼠強(qiáng)的原理并簡(jiǎn)述此方法檢測(cè)固體樣品的過程?
● 試劑盒法檢測(cè)原理:毒鼠強(qiáng)可與二羥基萘二磺酸發(fā)生反應(yīng)變?yōu)榈仙痉椒z出限為1ug,低檢出濃度為2ug/ml,濃度高時(shí)可變?yōu)樯罴t色。
● 檢測(cè)固體樣品過程:取2mL或2g樣品放入比色管中,加入5mL乙酸乙酯,充分振搖,靜置,取上清液2mL于試管中或表面皿上,在 85℃左右水浴中加熱,待乙酸乙酯剩余1mL以下時(shí),提高水浴溫度揮干余液,放至室溫后,加入1mL的純凈水充分溶解殘?jiān)?,加?滴毒鼠強(qiáng)顯色劑,輕輕搖勻,加入 5mL毒鼠強(qiáng)試液,輕輕搖動(dòng)后,將試管放入90℃以上水浴中,加熱5min后取出,觀察顏色變化。溶液顏色變?yōu)榈霞t色為毒鼠強(qiáng)陽性反應(yīng),隨著毒鼠強(qiáng)濃度增加,紫色加深。
生長(zhǎng)激素釋放多肽ELISA試劑盒(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-β1ELISA試劑盒,本應(yīng)用試劑盒已完成多中心臨床驗(yàn)證,并通過國(guó)家食藥監(jiān)總局的認(rèn)證。我司通過建立覆蓋歐美的全球采購(gòu)中心,與歐美1000多個(gè)品牌建立了正式的代理與合作,涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,具有壓倒性地優(yōu)勢(shì)。產(chǎn)品領(lǐng)域:分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。主營(yíng)產(chǎn)品:流式抗體、ELISA試劑盒、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-β1ELISA試劑盒試劑盒(多種屬)行業(yè)操作流程如下:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF工作液50μl?!?
(5)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)?!?
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔工作液 100μl?!?
(8)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!?
(9)洗板,同(4)?!?
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min?!?
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?!?
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以由容器上的劃痕或指印等造成的光。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定。
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編輯:小檀20180918