CD143[血管緊張素轉(zhuǎn)化酶]ELISA試劑盒 標(biāo)準(zhǔn)品
● 試劑盒操作步驟如下: ●
1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知,因此有必要檢測(cè)寬范圍的稀釋度。
2.制備硝酸纖維素膜,用鉛筆標(biāo)上每個(gè)待測(cè)一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來(lái)說(shuō),一抗要檢測(cè)一到兩個(gè)稀釋度,而二抗要檢測(cè)兩到三個(gè)稀釋度。
3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個(gè)點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl),以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品,在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘,或直至無(wú)可見(jiàn)水分。
4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn),室溫震蕩孵育1h。
5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
6.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。
8.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。
9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤(rùn),且印跡點(diǎn)在孵育過(guò)程中不會(huì)干。
10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。
11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。
12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時(shí)間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。
13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號(hào)可能會(huì)持續(xù)6-24小時(shí),這取決于具體的產(chǎn)品。
白介素17ELISA試劑盒(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌
CD143[血管緊張素轉(zhuǎn)化酶]ELISA試劑盒,本應(yīng)用試劑盒已完成多中心臨床驗(yàn)證,并通過(guò)國(guó)家食藥監(jiān)總局的認(rèn)證。我司通過(guò)建立覆蓋歐美的全球采購(gòu)中心,與歐美1000多個(gè)品牌建立了正式的代理與合作,涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,具有壓倒性地優(yōu)勢(shì)。產(chǎn)品領(lǐng)域:分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。主營(yíng)產(chǎn)品:流式抗體、ELISA試劑盒、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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●使用 RIPA 提取的總蛋白總結(jié)●:
1. 并非是真正意義上的總蛋白,相當(dāng)一部分蛋白丟失在棄去的不可溶組分中。
2. 很多常用的內(nèi)參,如 Actin,tubulin,LaminA,H3 等均在 RIPA 不可溶組分中被丟失。
3. 目標(biāo)蛋白可能會(huì)在 RIPA 不可溶組分中被丟失,也可能不被丟失,具有不可預(yù)見(jiàn)性,非選擇性。
4. 同種蛋白在不同樣品中丟失的情況并不相同,蛋白丟失并不成比例。
5. 利用目的蛋白和內(nèi)參比值做校正會(huì)出現(xiàn)偏差,不適合 WB 目的蛋白的半定量分析。
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編輯:小檀20180918