白介素5ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒

引起 ELISA 測定結(jié)果與文獻報導不一致的原因主要有三點，試劑因素、標本因素和操作因素。 試劑因素：1. 試劑應選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用，包括底物和洗滌液。由于校準標準有差異，還有抗體、檢測方法、試劑、交叉反應等因素都會導致對樣本的檢測結(jié)果不一致。如：有的廠家酶標板孔間 CV 值大于 20%，標記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差，使用劣質(zhì)的試劑必然導致結(jié)果的假陽性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號和出廠日期，雖然試劑的有效期多為 1 年，好選擇剛出廠的試劑盒。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標范圍，用一種指標來冒充其它指標，造成各種種屬、各種指標都可以做的假象。 標本因素和操作因素： 血清是常用的 ELISA 標本，血漿一般可視為與血清同等的標本，標本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致，分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。 內(nèi)源性物質(zhì):有人認為大約 40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有：類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應物質(zhì)和其它物質(zhì)等。 外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA 測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。

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●控制和消除誤差的方法:● 誤差的大小，直接關(guān)系到分析結(jié)果的精密度和準確度。減少誤差的措施有如下幾種： 1、正確選取樣品量 樣品量的多少與分析結(jié)果的準確度關(guān)系很大。在常量分析中，滴定量或重量過多或過少都直接影響準確度。在比色分析中，含量與吸光度之間往往只在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。這就要求測定時讀數(shù)在此范圍內(nèi)，以提高準確度。通過增減取樣量或改變稀釋倍數(shù)可以達到此目的。 2、增加平行測定次數(shù) 減少偶然誤差測定次數(shù)越多，則平均值就越接近真實值，偶然誤差亦可抵消，所以分析結(jié)果就越可靠。一般要求每個樣品的測定次數(shù)不應少于兩次，如要更**的測定，分析次數(shù)應更多些。 3、對照試驗 對照試驗是檢查系統(tǒng)誤差的有效方法。在進行對照試驗時，常常用已知結(jié)果的試樣與被測試樣一起按完全相同的步驟操作，或由不同單位、不同人員進行測定，后將結(jié)果進行比較。這樣可以抵消許多不明了因素引起的誤差。 4、空白試驗 在進行樣品測定過程的同時，采用完全相同的操作方法和試劑，惟獨不加被測定的物質(zhì)，進行空白試驗。在測定值中扣除空白值，就可以抵消由于試劑中的雜質(zhì)干擾等因素造成的系統(tǒng)誤差。 5、校正儀器和標定溶液 各種計量測試儀器，如實驗室電子天平、旋光儀、分光光度計，以及移液管、滴定管、容量瓶等，在**的分析中必須進行校準，并在計算時采用較正值。各種標準溶液(尤其是容易變化的試劑)應按規(guī)定定期標定，以保證標準溶液的濃度和質(zhì)量。 6、嚴格遵守操作規(guī)程 分析方法所規(guī)定的技術(shù)條件要嚴格遵守。經(jīng)國家或主管部門規(guī)定的分析方法，在未經(jīng)有關(guān)部門同意下，不應隨意改動。

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編輯：小檀20180918