甲狀旁腺激素ELISA試劑盒 ELISA實(shí)驗(yàn)
● 試劑盒操作步驟如下： ●
1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知，因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。
2.制備硝酸纖維素膜，用鉛筆標(biāo)上每個(gè)待測一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說，一抗要檢測一到兩個(gè)稀釋度，而二抗要檢測兩到三個(gè)稀釋度。
3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個(gè)點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl)，以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品，在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘，或直至無可見水分。
4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn)，室溫震蕩孵育1h。
5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。
6.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。
7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。
8.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。
9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤,且印跡點(diǎn)在孵育過程中不會(huì)干。
10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。
11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。
12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時(shí)間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。
13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號(hào)可能會(huì)持續(xù)6-24小時(shí),這取決于具體的產(chǎn)品。
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【注意事項(xiàng)】
1.請按照操作步驟進(jìn)行測試，操作時(shí)請勿觸摸試紙顯示區(qū)。
2.如購買時(shí)發(fā)現(xiàn)過期，破損，污染，無效的產(chǎn)品，請到購買處更換。
3.本品為一次性產(chǎn)品，請勿重復(fù)使用。
4.出現(xiàn)陽性結(jié)果，建議用本卡復(fù)查一次。
5.自來水、蒸餾水或去離子水不能作為陰性對(duì)照。
6.由于樣品（尿和飼料）的差異，有的檢測線可能偏淡或偏暗，但只要出現(xiàn)條帶，就可判定為陰性結(jié)果。
7.若需直接檢測標(biāo)準(zhǔn)品，請用PBS或PB配制。
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編輯：小檀20180918