白介素6ELISA試劑盒(多種種屬)實驗科研認可品牌
● 試劑盒操作步驟如下： ●
1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知，因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。
2.制備硝酸纖維素膜，用鉛筆標上每個待測一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說，一抗要檢測一到兩個稀釋度，而二抗要檢測兩到三個稀釋度。
3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點在膜上。每個點的體積越少越好(1-5μl)，以保證點盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品，在點完一次后,干燥2-5分鐘,再點一次。讓膜干燥10-15分鐘，或直至無可見水分。
4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點，室溫震蕩孵育1h。
5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。
6.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。
7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。
8.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。
9.準備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點完全濕潤,且印跡點在孵育過程中不會干。
10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。
11.將膜取出,放在塑料布或其它防護膜上。
12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。
13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號可能會持續(xù)6-24小時,這取決于具體的產(chǎn)品。
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白介素6ELISA試劑盒，本應(yīng)用試劑盒已完成多中心臨床驗證，并通過國家食藥監(jiān)總局的認證。我司通過建立覆蓋歐美的全球采購中心，與歐美1000多個品牌建立了正式的代理與合作，涵蓋所有的生物試劑門類，特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品，具有壓倒性地優(yōu)勢。產(chǎn)品領(lǐng)域：分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、細菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。主營產(chǎn)品：流式抗體、ELISA試劑盒、標準品和對照品、生化試劑、抗體和抗原、細胞因子、技術(shù)服務(wù)、實驗耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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引起 ELISA 測定結(jié)果與文獻報導(dǎo)不一致的原因主要有三點，試劑因素、標本因素和操作因素。
試劑因素：1. 試劑應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。
2.不同廠家的試劑一定不能混用，包括底物和洗滌液。由于校準標準有差異，還有抗體、檢測方法、試劑、交叉反應(yīng)等因素都會導(dǎo)致對樣本的檢測結(jié)果不一致。如：有的廠家酶標板孔間 CV 值大于 20%，標記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差，使用劣質(zhì)的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽性或假陰性。
3. 要注意試劑的批號和出廠日期，雖然試劑的有效期多為 1 年，好選擇剛出廠的試劑盒。
4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標范圍，用一種指標來冒充其它指標，造成各種種屬、各種指標都可以做的假象。
標本因素和操作因素：
血清是常用的 ELISA 標本，血漿一般可視為與血清同等的標本，標本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致，分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。
內(nèi)源性物質(zhì):有人認為大約 40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA 測定的血標本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。
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編輯：小檀20180914