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●穩(wěn)定轉(zhuǎn)染●:即進(jìn)入細(xì)胞的質(zhì)粒整合入細(xì)胞基因組中,并能隨細(xì)胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。這是相對(duì)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染而言的。 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的表達(dá)時(shí)間短暫,外源基因?qū)胝匣蚪M的幾率非常低,絕大部分以游離形式存在,不能隨細(xì)胞分裂而一同復(fù)制,導(dǎo)致后拷貝數(shù)被稀釋?zhuān)瑹o(wú)法達(dá)到持續(xù)表達(dá)外源基因的目的。一般用轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,多為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。 ●一般如下情況需要構(gòu)建穩(wěn)定株●: 1. 長(zhǎng)期在目的細(xì)胞中研究基因功能,通過(guò)構(gòu)建穩(wěn)定株,可以大大降低頻繁轉(zhuǎn)染或者病毒包裝的成本,也極大方便實(shí)驗(yàn)研究; 2. 部分蛋白半衰期極長(zhǎng),瞬時(shí) RNA 只能干擾表達(dá),無(wú)法去除已經(jīng)表達(dá)的目的蛋白,通過(guò)構(gòu)建穩(wěn)定株可以實(shí)現(xiàn)更好的基因干擾效果; 3. 瞬轉(zhuǎn)往往會(huì)引入極高拷貝數(shù)的表達(dá),導(dǎo)致因?yàn)槿藶橐蛩卦斐蓪?shí)驗(yàn)結(jié)果的不**,構(gòu)建穩(wěn)定株可以幫助篩選拷貝數(shù)適量的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究; 4. 需要用誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的,主要是一些致死基因或者是需要時(shí)空表達(dá)的; 5. 需要用細(xì)胞做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的,比如裸鼠成瘤等,往往需要構(gòu)建成穩(wěn)轉(zhuǎn)株。

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●體外診斷試劑產(chǎn)品的預(yù)期用途指什么?● 答:體外診斷試劑產(chǎn)品的預(yù)期用途一般是經(jīng)過(guò)食品藥品監(jiān)督管理部門(mén)批準(zhǔn)的,有其科學(xué)性和法定性,如“輔助診斷”與“診斷”、“早期診斷”、“篩查” 、“治療監(jiān)測(cè)”、“個(gè)體化用藥”(伴隨診斷)等,同時(shí)在說(shuō)明書(shū)上應(yīng)標(biāo)示定量檢測(cè)或是定性檢測(cè),樣本類(lèi)型有何要求等。 產(chǎn)品預(yù)期用途必須與該產(chǎn)品注冊(cè)或備案證明文件中的相應(yīng)內(nèi)容相一致,不得隨意夸大或變更。

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編輯:小檀20180911