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突破早期診斷大關,對疾病診治的提升有著非同尋常的意義。

細胞凋亡發(fā)生時,內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶將分解核小體區(qū)間的雙鏈DNA,但核小體本身由于由組蛋白緊密結合而免受切割,單克隆抗體可以與核小體形成夾心結構,可通過檢測核小體判斷細胞是否經(jīng)歷凋亡事件。 原理:●細胞凋亡的發(fā)生,是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產(chǎn)生180bp~200bp或其倍數(shù)的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內(nèi)切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法,應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體,與核小體片段形成夾心結構,可特異性檢測細胞溶解物中的核小體片段。

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ELISA應用:ELISA檢測技術早在19世紀70,80年代就開發(fā)出來用于替代放射性同位素標記技術用于研究蛋白質(zhì)間的相互作用(配體-受體,抗原-抗體),到如今已經(jīng)接近50年的歷史了。這個技術從科研的角度來說已經(jīng)不具備**性,沒有太多的價值,不值得專門進行研究,更多的是一個使用的工具。工業(yè)應用落后于基礎研究,ELISA技術在制藥領域的應用隨著近20年生物制藥領域的迅猛發(fā)展展現(xiàn)著越來越多的使用價值,當然ELISA的應用情況也越來越復雜,這樣的復雜性也使得早期的基礎研究并不再具有很好的指導意義,ELISA方法濫用錯用往往導致實驗結果出現(xiàn)系統(tǒng)性偏差,影響實驗結果的真實性,做出錯誤的選擇。本文的寫作目的旨在作為文獻之外關于ELISA實際應用的一個總結,反補基礎研究的不足,使得該技術更具使用價值。

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編輯:小檀20180906